Как разбавлять протеин


Как разводить протеин с водой и молоком? Пропорции, правила приема

Протеин — это белковая пищевая добавка. Прием протеина обусловлен необходимостью набора дневной нормы белка. Это особенно касается бодибилдеров и людей, которые стремятся к построению рельефного и мощного мышечного корсета. Купив порошок в спортивном магазине, люди задаются вопросом: "А как разводить протеин?".

Как выбрать основу для разведения протеина?

Протеин обычно разводиться молоком или водой. Иногда протеин замешивают на соке, компоте, кефире, чае, лимонаде и т. д. Молоко является идеальным вариантом. Оно богато кальцием, белком и полезными углеводами. Но если есть непереносимость лактозы, то от молока придется отказаться в пользу воды или другой основы. Даже если с лактозой у вас все в порядке, учитывайте следующее:

  • молоко добавит калорийности;
  • на молоко организм реагирует резким скачком инсулина.

При всем при этом молоко улучшает вкус коктейля. Если вы соблюдаете диету, то учитывайте калорийность молока и инсулиновый ответ организма. Вам необходимо держать инсулин на низком уровне. Однако протеиновый коктейль с утра — это хорошая идея даже для худеющих, так как чувствительность к инсулину с утра высокая, и углеводная толерантность тоже высока. Если вы хотите набрать мышечную массу, то коктейль на молоке — отличное решение.

Как принимать протеин?

На упаковке продукта производитель обязательно пишет инструкцию по применению. На всех банках с протеином можно найти информацию о количестве микронутриентов и других питательных веществ, содержащихся в одной мерной ложке. Прежде чем начинать принимать, стоит ознакомиться с инструкцией к продукту. Некоторые протеины низкоуглеводные, в других достаточно много углеводов. В некоторых протеиновых порошках больше белка, чем в других.

Только ознакомившись с составом и учитывая свои дневные нормы, можно высчитать необходимое количество протеина. Однако, вне зависимости от этого, существуют общие рекомендации. Например, в дни тренировок протеин рекомендуется принимать дважды. Первый раз — за один час до начала тренировки. Это позволит защитить мышцы от распада и подкормит их во время тренировки. Второй раз — сразу после тренировки в течение получаса. В это время организму для восстановления сил нужны питательные вещества и особенно белок.

Вообще, получить дневную норму белка из протеина очень легко. Но профессионалы не рекомендуют этого делать. Лучше всего получать белок по схеме 50/50, т. е. 50 % из натуральной белковой пищи, и 50 % из протеинового порошка.

Схема приема протеина

Построение спортивного тела невозможно без белков. Все белковые смеси делятся на быстрые, медленные и комплексные.

Быстрые протеиновые смеси пьют утром и после тренировки для восполнения запасов аминокислот. Медленный протеин принимают на ночь, чтобы обеспечить клетки и ткани необходимым запасом питательных веществ. Если вы стремитесь сбросить вес, то можете заменить медленным протеином один прием пищи. Комплексные смеси можно употреблять как после тренировки, так и перед сном.

Количество белка в сутки

После тренировки "на массу" рекомендуется принять 20-40 грамм белка в течение получаса. Количество белка зависит от мышечной массы. Есть рекомендация: не принимать более 30 грамм белка за один прием пищи. Этот показатель индивидуальный. Все зависит от здоровья организма, в частности, почек, и от способности организма переварить определенное количество белка. Знайте, что съедая, например, 200 грамм куриной грудки, вы потребляете за раз 46 грамм белка.

Как рассчитать свою норму белка в сутки?

Рекомендуется в сутки потреблять 2-3 грамма белка на 1 кг веса. Для женщин эта норма немного меньше, чем для мужчин. Так, если вы женщина весом 60 кг, то дневная норма белка для вас составляет 120 грамм. Из них 60 грамм вы можете получать из протеинового порошка. Если вы мужчина, весом 60 кг, то вы вполне можете потреблять 180 грамм белка в сутки. Из них 90 грамм должны приходиться на натуральную пищу (куриная грудка, сыр, творог, молоко, яйца и прочие высокобелковые продукты).

Как разводить протеин?

Обычно одна мерная ложка протеинового порошка составляет 30 грамм. Стандартов по пропорциям не существует. Все зависит от вкусовых предпочтений. Чем больше порошка и меньше основы, тем слаще будет коктейль. Многое зависит и от самой основы. Например, коктейли на молоке слаще, чем на воде.

Итак, как разводить протеин с молоком? пропорции и количество указаны ниже.

На молоке протеиновая смесь получается достаточно сладкой, поэтому рекомендуется одну мерную ложку, т. е. около 30 грамм, разводить в 500 мл молока. Если вы собираетесь выпить две мерные ложки, то вам потребуется литр молока. Если говорить о том, как правильно разводить протеин с молоком, то можно рекомендовать либо использовать большой объем жидкости (1 литр), либо смешать молоко с водой, чтобы не было приторно сладко.

Для приготовления коктейля нужно брать молоко невысокой жирности.

Второй по популярности основой для разведения протеинового порошка является вода.

Как разводить протеин с водой? Точно так же, как и с молоком, только нужно учитывать вкусовые особенности. Разводить протеин с водой, как рекомендуют это профессиональные атлеты и производители протеиновых смесей, лучше всего в ручном шейкере. Шейкеры можно купить в тех же спортивных магазинах, что и протеин.

Как разводить протеин с водой? Пропорции и количество очень важны. На воде протеин получается менее сладким. На одну мерную ложку будет достаточно 200-250 мл воды. А для двух мерных ложек хватит и 500 мл. Для этого используется негазированная минеральная, очищенная либо кипяченая вода.

Как разводить протеин в шейкере?

Почему многие рекомендуют пользоваться шейкером для приготовления протеиновых коктейлей? Потому что благодаря шейкеру можно получить максимально однородную массу, которая по консистенции не будет напоминать манную кашу из детского сада с жуткими комочками. Как правильно разводить протеин в шейкере? Достаточно просто налить в шейкер молоко, насыпать необходимое количество протеина, закрыть крышку и трясти шейкер до тех пор, пока масса не станет однородной. В ручных шейкерах для этого предусмотрены специальные шарики или сетки.

Состав коктейля

Если протеин разводится на молоке, тогда в состав коктейля, кроме белка, входят еще и углеводы с жирами. Многие производители обогащают свой продукт витаминами, например, витамином В. Смысла в этом мало, так как потребность в витаминах покрывается пищей и витаминными добавками. Как разводить протеин, обогащенный минеральными добавками и витаминами? Лучше всего такой протеин принимать с водой. Почему? Все очень просто. Если протеин обогащен, например, железом, то его нельзя принимать с молоком. В самом молоке содержится достаточно большое количество витаминов. Некоторые компоненты молока могут нейтрализовать компоненты протеина. Зачем же производители обогащают протеин? Ради прибыли, все просто. Если и говорить об обогащении протеина, то лучше всего добавлять в него аминокислоты.

Качество протеинового порошка

Идеальный белок для человека содержит на 1 грамм:

  • Изолейцин - 40 мг.
  • Лейцин - 70 мг.
  • Лизин - 55 мг.
  • Метионин и цистин в сумме - 35 мг.
  • Фенилаланин и тирозин в сумме - 60 мг.

Идеальным для роста считается белок, соответствующий молоку матери. Ближе всего к нему подошел сывороточный протеин. На рынке сегодня присутствуют: сыворотки, яичный белок, казеин, соя, пшеничный белок. Растительный белок является неполноценным, так, например, в пшеничном белке содержится мало лизина.

Как разводить сывороточный протеин? Так же, как и любой другой. Сывороточный протеин - это не что иное, как белки, полученные из молочной сыворотки.

Усвояемость протеина

Усвояемость обычно напрямую связана с источником белка и с аминокислотным составом. Сывороточные протеины относятся к быстроусвояемым протеинам. Они перевариваются организмом в течение 2-3 часов. Казеин — это медленный белок, хотя он усваивается быстрее соевого. Но вы не найдете белок, который будет усваиваться более 5-6 часов. Медленные белки имеют преимущество перед быстрыми в том, что они оказывают постоянное и равномерное поступление аминокислот.

Изолят сывороточного протеина

Изолят сывороточного протеина характеризуется высокой степенью очистки (более 85 % белка), в котором нет жиров и углеводов. При изготовлении изолята молочную сыворотку обезвоживают, удаляют лактозу, вредный холестерин, животный жир. Изолят помогает быстро восстановить мышцы после силовой тренировки, препятствует катаболизму и усиливает анаболизм.

Изолят, благодаря высокой очистке, менее аллергенный, чем концентрированные протеины. Эта добавка является незаменимой для бодибилдеров с непереносимостью лактозы. По сравнению с обычными изолятами, сывороточный лучше усваивается, оказывает антиоксидантное воздействие, повышает иммунитет.

100 % Whey Gold Standard - это сывороточный протеин, который достаточно распространен среди атлетов. Он идеально подходит после анаэробной тренировки. Как разводить протеин 100 % Whey Gold Standard с молоком? Для начала посчитайте, сколько белка в день вам нужно. Разделите пополам дневную норму. И из протеина потребляйте не больше половины. В идеале соотношение природного белка к протеину должно быть 2:1.

Заключение

Если вы пьете протеин 2-3 раза в день, разделите норму на эти приемы. Обычно за один прием не принимается больше одной мерной ложки, т. е. 30 грамм. Мерная ложка, кстати, обычно идет в комплекте с протеином (внутри банки), но в этом лучше лишний раз убедиться, если вы покупаете продукт неизвестного вам ранее производителя. Для наращивания мышечной массы протеин делят на 5-6 приемов. Но обычно протеин пьют 1-2 раза в день. Если вы съели блюдо, богатое белками, то протеин лучше принимать через 3-4 часа после еды.

Протеин не заменяет приемы пищи. За исключением случаев, когда вам необходимо похудеть. Тогда можно заменить тяжелым протеином, например, казеиновым, один прием пищи. За основу лучше взять кефир. Как разводить протеин с кефиром? В 250 мл кефира растворите одну ложку порошка. Воспользуйтесь шейкером (лучше всего автоматическим), чтобы порошок качественно растворился в густой основе. Размешивать протеин можно и обычной вилкой, если хорошо постараться.

Если вы собираетесь взять коктейль на тренировку, чтобы выпить его сразу после тренировки, то перелейте его в термос, чтобы он не успел закиснуть в жару или замерзнуть в сильный холод. Готовый коктейль нужно выпить в течение 3 часов. Даже если он хранится в холодильнике, лучше использовать его в течение 5 часов. Протеиновые порошки, в составе которых находится креатин, выпиваются сразу после смешивания. При длительном контакте с жидкостью аминокислота креатин быстро деградирует.

Помните, что даже самый высокоочищенный, обогащенный и дорогой протеин не сравнится с натуральной пищей. Атлеты пытались заменить приемы пищи протеином. Они выяснили, как разводить протеин, пропорции тоже были соблюдены, но вот роста мышечной массы не последовало. Это значит только то, что протеин не заменит природного белка, который должен присутствовать в ежедневном рационе.

Перед тем как начать пить протеин, посоветуйтесь со своим тренером. Он распишет ваш режим питания с учетом протеиновой добавки. Кроме этого, тренер может посоветовать вам хорошего производителя и расскажет, когда лучше употреблять сывороточный протеин, а когда казеиновый.

Если вы вегетарианец, вам подойдет соевый или пшеничный протеин. Но учитывайте то, что они, как и растения, не содержат все необходимые аминокислоты. Кроме того, соя и пшеница являются генномодифицированными растениями. А пшеница — это глютеновый белок, на который у многих есть скрытая, т. е. не установленная, аллергия. Если после приема соевого или пшеничного протеина у вас появляются неприятные ощущения (боль, вздутие, понос/запор), прекратите прием.

Как правильно разводить протеин | Proka4aem.ru

Как разводить протеин, чтобы он максимально усвоился? Необходимо точно соблюсти пропорции «порошок/жидкость», и не использовать жидкости, которые не указал в качестве допустимых производитель. Например, некоторые протеиновые смеси прекрасно разводятся и в воде, и в молоке, и в соке, а некоторые требуют разведения только в подогретом обезжиренном молоке или только в мягкой теплой воде. Определяется это в первую очередь составом самого коктейля. Например, если в нем есть крупного помола креатин, растворить коктейль в холодной воде до приемлемого по вкусу однородного состояния практически невозможно.

Важно также правильно подобрать способ взбивания. Перед тем, как разводить протеин в шейкере, убедитесь, что производитель предусмотрел такую возможность! Некоторые смеси допускают смешивание в ручном шейкере (хотя это все равно будет неслабая дополнительная тренировочка на бицепс, трицепс и их мышцы-синергисты). Другие смеси — и это всегда указано на упаковке! — требуют применять электромиксер или блендер. Чтобы все их ингредиенты набухли и растворились, равномерно распределились в пене, им нужно продолжительное время взбивания.

Можно ли разводить протеин в соке? Это допускают лишь некоторые рецептуры, как правило, не включающие в свой состав молочный белок. Либо получается очень интересная консистенция — с хлопьями. На вкус будет все равно неплохо, так что если первый эксперимент удался, и протеин все же растворился, как смог, это хороший способ разнообразить питание.

Правила разведения протеина

Основное правило — точно отмерить компоненты, соблюсти температуру жидкости, всыпать порошок в жидкость и взбивать ДОЛГО! Ну не меньше 10 минут, как минимум, в ручном шейкере, и 5 минут в миксере. После каждого смешивания коктейля емкость и смешивающие элементы (и особенно пружинящий шарик шейкера) необходимо тщательно мыть и сушить: микробы считают протеиновые коктейли прекрасной питательной средой и начинают развиваться на стенках невымытой чаши миксера буквально сразу же. Остатки молочного жира, прогоркая и пропитывая своим запахом пластик, тоже могут серьёзно испортить впечатление от последующих порций.

Шейкер, в котором приготавливается и хранится молочный коктейль, необходимо регулярно стерилизовать. Если вы планируете брать с собой уже разведенный коктейль и хранить его в шейкере несколько часов, его стакан должен быть изготовлен строго из полипропилена! Только этот пластик выдерживает кипячение, абсолютно безвреден для нашего организма и практически не впитывает в себя жир.

Как разводить протеин с водой

Обычно в воде разводят протеин в период сушки, если у спортсмена непереносимость лактозы либо он вегетарианец. Существуют специальные смеси, которые разводятся исключительно в воде, при этом они неплохо миксуются и в ручном шейкере. Порошок протеина всегда засыпают в уже отмеренную теплую воду. Можно ли разводить протеин горячей водой? Да, можно, но, разумеется, не кипящей, а с температурой не более 60 градусов Цельсия. В холодной воде протеин растворяется хуже, чем в теплой. В слишком горячей воде белок денатурирует, «заваривается».

Обычные «молочные» смеси в воде разводятся плохо, дают некоторую потерю в белке, слишком резкий вкус (поскольку именно молоко его смягчает) и хуже набухают. Они практически не растворяются при ручном взбалтывании в шейкере. Поэтому лучше обычный «молочно-растворяемый» протеин с водой не миксовать, либо увеличивать время взбивания и использовать только электромиксер.

Много спорят и о том, в какой воде разводить протеин. Если есть возможность, это надо делать в теплой родниковой, питьевой слабоминерализованной либо теплой водопроводной воде, прошедшей очистку обычными (не мембранными и не осмотическими) фильтрами.

Вода, прошедшая очистку в осмотических фильтрах — дистиллированная, в ней нет минеральных солей, и для спортсмена это практически яд. Необходимо помнить, что мы получаем с питьевой водой 30% солей кальция, магния, калия и фосфора, необходимых нам для жизни (и тем более для тренировки, которая приводит к повышенным тратам электролитов, уходящих с потом).

Как разводить протеин с молоком

В шейкер или миксер сперва заливают молоко (желательно охлажденное), затем высыпают порошок протеина или гейнера и включают миксер на слабые обороты. Не наоборот! Еще хуже, когда смесь протеина высыпают в мокрый миксер и лишь потом заливают молоко, а миксер сразу включают на высокую скорость. В этом случае порошок комкуется, прилипает к стенкам, и половину белка из порции вы потеряете, даже если будете взбивать смесь вдвое дольше.

Как правильно разводить протеин в шейкере

В шейкер наливают жидкость (не более половины объема), помещают в неё взбивающий элемент (пружину, сфероид и т.д.), засыпают порошок и, закрыв крышку, взбалтывают — сперва легкими круговыми движениями, распределяя порошок в объеме жидкости и перемешивая, затем увеличивают амплитуду, интенсивность и скорость движений.

Попытка сразу применить максимальные амплитуды приведет к тому, что порошок слипнется в комочки или прилипнет к стенкам. Кроме того, всегда есть риск, что крышка неплотно закрыта…

Сколько хранится разведенный протеин?

В среднем производители указывают, что разведенный протеин можно хранить несколько часов, в основном это зависит от жидкости, на которой производилось разведение, от температуры воздуха и от условий приготовления: микробиологической чистоты посуды, рук и воздуха в помещении, где отмеривали продукты. Молоко, даже стерилизованное, в коктейле очень быстро скисает без холодильника, и хранить его больше 2-3-х часов нерационально. В сущности, периода «жизни» разведенного коктейля хватает на время тренировки, чтобы можно было половину коктейля выпить до, а половину — после неё.

Коктейли, разведенные на холодной воде или соке с естественными консервантами, можно хранить до 10 часов. Микробиологическая порча в них начинается не так быстро, как в молочных, но они сильнее расслаиваются и требуют дополнительного взбивания перед употреблением. Что намного хуже, в них идет разрушение белка. Даже если напиток и останется безопасным, для здоровья, он может потерять свои специальные свойства. А тогда предварительное разведение становится бессмысленной тратой денег.

Хранить разведенный коктейль — не самый лучший вариант, в идеале белковый коктейль разводят непосредственно перед употреблением, именно на этом и настаивают производители. Поэтому, если приходится готовить напиток заранее, желательно уточнить у производителя, сколько можно хранить разведенный протеин конкретной марки и в каких условиях.

Отличница из г. Москва изобрела жиросжигатель! 12 см в талии уходит за неделю, если смешать с кефиром...

Как разводить протеин: что выбрать молоко, сок или воду

Содержание статьи

 При занятиях в спортзале, независимо оттого  какая цель, набрать мышечную массу

или похудеть, может встать вопрос о приеме спортивных добавок, помогающих быстрее восстановиться после интенсивной тренировки. Восполнить нехватку белка помогают протеиновые коктейли – популярные среди новичков и более опытных спортсменов. Но прежде чем начать прием необходимо узнать, с чем лучше смешивать и как разводить смесь.

 Важность правильного использования отражается на качестве разведенного напитка, поскольку потеря полезных свойств коктейля не даст получить необходимого эффекта. Магазины спортивного питания представляют на выбор большой ассортимент вкусов протеина: ягодный, шоколадный, клубничный, банановый, что позволяет подобрать для себя наиболее подходящий.

 Многих интересует, как разводить протеин? Точное количество белковой смеси рассчитывается исходя из личных потребностей, веса и физических нагрузок. Суточная норма белка рассчитывается как 1,5-2 г на 1 кг тела с расчетом на высокие физические нагрузки. Одна ложка протеина содержит около 30 г белка, поэтому для приготовления одной порции достаточно одной ложки. Многие в погоне за быстрым результатом употребляют по 2-3 ложки протеина за раз, что делать категорически нельзя, данное количество белка не сможет усвоиться организмом.

 Количество жидкости определяется самостоятельно, обычно для разведения одной порции достаточно 200 мл, но при желании можно и больше. Если шейкер имеет больший объем, то можно использовать больше количество жидкости. При использовании двух мерных ложек протеина объем жидкости следует увеличить до 0,5 л.

 Разводить протеин лучше всего с молоком, но также подходят кисломолочные напитки, вода и сок, в зависимости от вкусовых предпочтений и желаемого результата. Разводить напиток следует непосредственно перед употреблением, так сохранится максимальное количество полезных веществ. Рекомендуется напиток употребить не позднее чем через час после разведения.

Разведение смеси той или иной жидкостью зависит от желаемой цели:

  1. Если цель набрать мышечную массу. В данном случае организму требуется получать большее количествокалорий, поэтому разведение протеина молоком или соком является отличным вариантом.
  2. При соблюдении диеты и желании избавиться от лишнего веса. В таком случае в организм не должно поступать лишних калорий, поэтому разводить протеин лучше всего водой. Но, несмотря на это, использовать молоко также необходимо и на это существует следующие аргументы. Первое: в утреннее часы чувствительность к углеводам и инсулину высокая, что позволяет выпить протеин на молоке в первой половине дня. Второе: в дни физических нагрузок организму требуется восполнять потраченные силы за счет дополнительных калорий, поэтому протеин разведенный молоком можно использовать после тренировки. Таким образом, необходимые питательные вещества будут в скором времени доставлены к мышцам для их восстановления. Поэтому разведение протеина молоком при соблюдении диеты допустимо.  Но стоит учесть, что при употреблении вредных продуктов и использовании протеина с молоком можно получить противоположный эффект.

Как разводить протеин с водой

 Многих интересует, что лучше протеин с молоком или водой? Если нет с собой

молока или имеется его непереносимость, то для разведения можно использовать обычную воду, компот или сок.Воду следует выбирать тем, кто старается снизить дневную калорийность рациона и спортсменам на сушке, также  такой вариант является более бюджетным.

 Как правильно разводить протеин? Вшейкер или стакан налить воду, насыпать необходимое количество протеина и хорошо взболтать.

 На воде протеин получается менее вкусным, но более низкокалорийным. Вместо простой воды разрешено использовать газированную несладкую воду, минеральную или любую другую, главное чтобы она была кипяченой, фильтрованной или покупной.

 Можно ли протеин разводить горячей водой? Разведение протеина горячей водой запрещается, поскольку белки под действием высоких температур сворачиваются, помимо этого уменьшается количество полезных веществ.

 В какой воде разводить протеин теплой или холодной? Лучше всего разводить в теплой воде, поскольку в холодной смесь может плохо размешаться, и коктейль будет содержать комочки.

Как разводить протеин с молоком

 Многих начинающих спортсменов интересует, чем и  как разбавлять протеин? Одним из популярных и распространенных продуктов для разведения протеина является молоко, которое следует выбирать с учетом следующих особенностей:

  1. При разведении протеина с молоком следует смотреть на реакцию организма, поскольку могут наблюдаться неприятные симптомы ввиду непереносимости лактозы.
  2. Протеин с чем лучше мешать? Для разведения белка неважен выбор определенного вида молока, будь то ультрапастеризованное, парное или цельное. Практически каждый из них имеют одинаковое соотношение белков, жиров и углеводов, единственное, на что следует обратить внимание – жирность молочного продукта, поскольку если цели набора массы нет, то использовать для разведения протеина следует нежирное молоко.
  3. С чем мешать протеин? Некоторые виды протеина плохо поддаются растворению в молоке по сравнению с водой, поэтому перед покупкой следует поинтересоваться о данной особенности, чтобы после размешивания не образовывалось комков.
  4. При употреблении протеина утром предпочтительно использовать молоко, в то время как вечером лучше применять воду, поскольку медленный белок молока ухудшает усвоение протеина.
  5. При решении набрать вес сочетание молока и протеина является идеальным, такой коктейль послужит хорошим толчком для запуска процесса. В стакане молока содержится около 70 калорий и 6 г белка. За один раз организм способен усвоить около 30 г белка, это следует помнить при приеме, поскольку неусвоенный белок отложиться в жировые запасы.

 Протеин чем разводить молоком или водой зависит от личных предпочтений, особенностей организма и требуемых результатов. Зная как протеин разбавлять, можно быстро и без ущерба для здоровья получить  фигуру мечты.

Протеин с соком

 Помимо молока и воды некоторые спортсмены используют для разбавления сок, использование которого имеет следующие особенности:

  1. Сок в сочетании с протеином следует выбирать при тяжелых и интенсивных тренировках, такой напиток поможет быстро восстановиться и восполнить энергию. Но такое сочетание разрешено только при наборе мышечной массы и тяжелых силовых тренировках.
  2. Сок содержит большое количество дополнительных микроэлементов и полезных веществ, которые помогают быстрее восстановиться после тренинга.
  3. К недостаткам сочетания сока и протеина является денатурация белка (при выборе цитрусового сока), но все же часть аминокислот и белка остается в неизменном состоянии.
  4. Сок содержит достаточно большое количество углеводов, которые увеличивают калорийность и мешают процессу похудения. Особенно это касается соков, содержащие сахар и другие добавки. Использовать сок стоит только спортсменам, решивших набрать массу, для похудения такое сочетание не подойдет.

В чем разводить протеин

 Производители рекомендуют делать коктейли с протеином при помощи шейкера, который максимально качественно способен размешать частицы добавки, не оставляя комочков, для этого следует налить в баночку жидкость и засыпать добавку, закрыть крышку и трясти до образования однородной массы.

Как разводить протеин с водой в шейкере?  Шейкер является удобным мерным

стаканчиком с крышкой и закрывающимся отверстием, через которое средство можно вылить в стакан или выпить из него. Шейкер позволяет развести белковую смесь без единого комочка даже в воде. После того как все компоненты будут помещены в сосуд, следует хорошо закрыть крышку и встряхивать шейкер до полного размешивания порошка.

 Как размешать протеин без шейкера? Если нет шейкера, смешать протеин с жидкостью можно при помощи других приспособлений. Для этого необходимо найти емкость с высокими бортами, венчик, вилку или блендер. После смешивания ингредиентов при помощи одного из выбранных предметов в емкости, взбить белковую смесь.

Можно ли разводить протеин

 Помимо важности правильного разведения протеина, необходимо знать правила его хранения. Если предварительно разведенную смесь требуется взять с собой на тренинг, то лучше всего его перелить в термос, так он не даст коктейлю скиснуть в жаркую погоду и охладеть зимой. В домашних условиях готовая смесь следует хранить в холодильнике, но не больше  пяти часов. Смеси, в составе которых содержится креатин, следует употреблять сразу, поскольку аминокислоты быстро деградируют при  контакте с жидкостью.

Можно ли заранее разводить протеин? Можно, но стоит учесть, что чем дольше такой напиток хранится в разведенном виде, тем меньше в нем остается полезных веществ. Разведенный напиток можно хранить при комнатной температуре не более четырех часов. Поэтому не рекомендуется смешивать протеин с жидкостью заранее, чтобы не зря не выкидывать дорогой продукт.Смесь в растворенном виде через несколько часов подвергается атаке бактерий и со временем полезные вещества полностью разрушаются.

Как разводить протеин с молоком: как правильно размешивать

Содержание статьи

Купив протеиновую смесь, многие атлеты сталкиваются с вопросом — как разводить протеин правильно? Действительно, при неверном разведении добавки, коктейль не только будет неприятно пить, но и могут возникнуть проблемы с пищеварением. Обычно, на упаковках есть особые указания производителей — как разбавлять протеин конкретной марки, когда лучше принимать и в какой порционной дозировке. Однако далеко не всегда инструкция на русском языке, да и мерные значения могут оказаться непонятными для жителей конкретной страны.

На самом деле, наводить смесь легко, достаточно иметь под рукой чистую емкость и миксер либо шейкер, который продается в любом магазине спортпита. Мерная ложка, при помощи которой рассчитывают порцию порошка, обычно находится в упаковке продуктов, но на крайний случай, можно взять обычную столовую и отмерять добавку «без горки».

Как выбрать жидкость для разведения

Перед приготовлением смеси, также нужно определиться, с чем разводить протеин лучше.

Самым идеальным вариантом жидкости для наведения продукта, является обезжиренное молоко. Оно обогащено кальцием, полезными углеводами и большим количеством белка. Как вариант, подойдет и кефир. Чтобы смесь получилась максимально полезной, нужно знать, как разводить протеин с молоком.

Для приготовления, нужно взять от 250 до 500 мл молока. При этом важно учесть — температура жидкости должна быть комнатной. Холодная негативно отразится на пищеварении, горячая — денатурирует белок. Смесь заливается молоком, а не наоборот, иначе коктейль получится с комочками.

Часто бывает, что молочки нет под рукой либо организм ее не переносит. Тогда можно разводить протеин с водой, соком или компотом.

Если используется вода — ее обязательно нужно профильтровать, прокипятить либо разводить смесь покупной водой из бутылки — обычной или минеральной.

Не рекомендуется использовать газированные жидкости, особенно перед тренингом, а также напитки с большим содержанием консервантов, красителей, ароматизаторов.

Как размешивать добавку

Правильно размешивать протеин в шейкере. Это самый удобный вариант для получения однородной смеси. Шейкер — это такой мерный стаканчик с удобной крышкой и закрывающимся носиком, через который добавку можно наливать либо просто пить. После того, как все ингредиенты помещаются в него, крышку плотно закрывают и поступательными плавными движениями, встряхивают стаканчик вверх-вниз до полноценного размешивания.

Размешать протеиновый коктейль без шейкера тоже можно. Для этого используется емкость с высокими бортиками и миксер либо самая обычная вилка. Самое главное, после употребления, необходимо тщательно вымыть всю используемую посуду, не допуская закисания остатков коктейля.

Однако мало знать, как размешивать протеин, необходимо еще учесть правила его хранения.

Если вы собираетесь взять напиток на тренинг, лучше всего поместить его в небольшой термос, чтобы он не успел охладиться в холодное время года или закиснуть в жару. Дома смесь нужно хранить в холодильнике, однако, не более 3-5 часов. Протеины в составе которых находится креатин, употребляются сразу после наведения, так как эта аминокислота при длительном контакте с жидкостью, очень быстро деградирует.

Если знать, как правильно разводить протеиновый коктейль, добавка окажет максимальную пользу и наиболее полноценно усвоится в организме.

Самые популярные вопросы:

— Можно ли разводить протеин в кефире?

— Да, кефир является молочным продуктом, содержащим в своем составе аминокислоты, а также кисломолочные бактерии, способствующие улучшению усвоения добавки. А кроме того, кефир идеальный продукт для страдающих непереносимостью лактозы.

— Можно ли разводить протеин с соком?

— Можно. В соке содержится фруктоза, а также большое количество витаминов, минералов и прочих питательных веществ. А, кроме того, вкусовые свойства протеина, при разведении с соком, значительно улучшаются.

— Как разводить протеин: пропорции?

— Обычно это от 250 мл и больше, жидкости, которой разбавляют 20-30 грамм сухой смеси. Главное, не превышать суточную норму белка, которая рассчитывается по формуле — 2 г\кг веса собственного тела.

— В какой воде растворять протеин?

— Протеин нужно растворять в кипяченой, минеральной либо отфильтрованной негазированной, теплой воде.

— Чем лучше разводить протеин водой или молоком?

— Протеин лучше разводить в молоке, так как оно богато аминокислотами и углеводами, незаменимыми для роста мышечной массы в период активного тренинга.

💪 Как пить протеин для набора мышечной массы. Какой лучше?

Необходимость употребления

Обычный человек, далекий от мира спорта, получает необходимое количество белка с пищей. Но при регулярных физических нагрузках возрастает потребность в протеине, поскольку именно белок придает силы и повышает выносливость. А еще он становится строительным материалом для мышечной ткани, которая повреждается во время тренировок. И если организму не будет хватать белка, то восстановление затянется, появятся сильные мышечные боли.

Особенная потребность в белке возникает у новичков, когда наблюдается максимальный прирост мышечной ткани. Прием спортивных добавок оказывает и психологический эффект – увеличивается мускулатура, хочется работать над телом дальше. Безусловно, мышцы растут и без покупных добавок, но намного медленней и с более длительным восстановлением.

Еще одна причина принимать протеиновые коктейли – похудение. Как правило, в спортзал идут или с лишним весом или с его недобором. И в обоих случаях протеин помогает нормализовать показатели веса. Если наблюдается избыток жировой прослойки, то регулярный прием протеина поможет убрать жир и нарастить мышцы. Для этого нужно принимать коктейль до и после тренировки, а также заменить им один перекус.

Как правильно разбавлять протеин, разводить протеины и готовить коктейли

Протеин – это одна из самых востребованных и популярных добавок в спортивном питании, поскольку он, являясь по сути белком, способствует наращиванию мышечной массы, созданию красивого рельефа мускулатуры, а также помогает атлетам сделать тренировки более эффективными.

Однако, впервые покупая протеиновый порошок, многие задумываются о том, как правильно приготовить коктейль из него, не нарушая главных полезных свойств и основных качественных характеристик. На самом деле это не сложно, нужно лишь придерживаться рекомендаций по приготовлению и употреблению.

Как и в какой жидкости растворять протеин

Обычно протеин выпускается в виде порошка, который перед употреблением необходимо растворить в какой-либо жидкости. Это может быть обычная вода, сок или молоко, но обязательно комнатной температуры. Не рекомендуется разводить протеин в горячей жидкости, так как белок может свернуться и потерять свои полезные свойства.

В чем именно растворять протеин порошок, каждый выбирает в зависимости от своих предпочтений. Кому-то нравятся натуральные соки, а кто-то выбирает молоко, которое должно иметь жирность 0,5-1,5%. И это никак не повлияет ни на вкусовые качества, ни на пользу протеина.

Чтобы порошок хорошо растворился, необходимо использовать шейкер для спортивного питания, купить который по лучшей цене в Украине можно в магазине спортивных товаров Mordex.Net. В нем готовый протеин коктейль можно взять с собой на тренировку, либо приготовить его прямо в спортзале. Для этого в шейкер заливается 200-300 мл жидкости, засыпается протеиновый порошок в количестве 30 г (3 ст. ложки) и тщательно перемешивается путем взбалтывания и перемещением шейкера вверх-вниз несколько раз. Придать коктейлю более насыщенный вкус можно добавлением в него меда, какао или фруктового сиропа.

Чтобы определиться с нужной густотой коктейля, можно увеличить количество жидкости до 400-500 мл, не увеличивая при этом порцию протеинового порошка. При выборе подходящего варианта консистенции каждый спортсмен ориентируется на свои вкусовые предпочтения.

Чтобы приготовить протеиновый коктейль в домашних условиях, можно использовать блендер или миксер, в которых масса получается более однородной и без комочков. К тому же, в этом случае можно добавить кусочки свежих фруктов, что существенно улучшит вкус добавки.

Рекомендации как разбавлять и пить протеин

Перед решением начать принимать протеиновые коктейли, необходимо обратиться к своему тренеру за консультацией. Он поможет правильно составить рацион питания и подберет суточную дозировку протеина. Обычно она рассчитывается индивидуально по определенной формуле и зависит от веса спортсмена, поставленных целей и общего состояния организма. Чаще всего рекомендуется употреблять не более 1-2 коктейлей в сутки.

Одной из главных ошибок новичков является то, что они принимают протеин вместо основных приемов пищи. Такое просто недопустимо, поскольку не принесет нужных результатов и не даст желаемого эффекта. Протеиновый коктейль необходимо пить между основными приемами пищи, употреблять в качестве перекуса, либо принимать через час после интенсивного тренировочного процесса.

SolCalc Help: Разбавление белкового раствора

4.1. Как разбавить основной раствор протеина?

Бычий сывороточный альбумин (БСА) представляет собой одну полипептидную цепь, состоящую примерно из 583 аминокислотных остатков и не содержащую углеводов. При pH 5-7 он содержит 17 внутрицепочечных дисульфидных мостиков и 1 сульфгидрильную группу. Теоретическая относительная молекулярная масса БСА по аминокислотной последовательности составляет 66 399. Альбумин - один из наиболее широко используемых белков в современных биологических исследованиях. Он действует как мощный антиоксидант в клеточной культуре.

Чтобы измерить и построить стандартную кривую зависимости концентрации белка от оптической плотности при 595 нм, необходимо приготовить серию разведений исходного раствора стандарта белка BSA. Исходные растворы используются для экономии времени на приготовление, экономии материалов, уменьшения пространства для хранения и повышения точности приготовления рабочих растворов с более низкой концентрацией. Самый простой способ определить объем основного раствора белка, необходимый для каждого разведения, - это использовать формулу C1V1 = C2V2.

Задача: Постройте калибровочную кривую, построив график зависимости среднего поглощения для каждой стандартной концентрации от целевой концентрации белка. Концентрация исходного раствора (C1) составляет 100 мг / л, а объем разбавленной пробы фиксируется на уровне 2 мл (V2). Стандарты белков следует готовить в том же буфере, что и анализируемые образцы. Удобную стандартную кривую можно построить с использованием бычьего сывороточного альбумина с концентрациями 0, 10, 20, 30, 40, 50 мг / л.

 == SolCalc - Лабораторный отчет == 30 сентября 2012 г. 10:46:02 BSA y (BSA) = 30 мг / л ======================= Для приготовления 2 мл раствора БСА с концентрацией 30 мг / л нам потребуется разбавить 0,6 мл 100 мг / л БСА до конечного объема 2 мл с деионизированной (дистиллированной) водой. ИСТОЧНИК: ------------- Имя: BSA Формула: BSA Вес формулы: 66399 г / моль РАСЧЕТ: ------------- Ключевой принцип заключается в том, что количество растворенного вещества в желаемом растворе должно быть равным к количеству растворенного вещества в исходном растворе.Помните, что концентрация - это количество растворенного вещества, деленное на объем раствора. Прежде чем производить какие-либо расчеты, мы должны убедиться, что используем только одну систему. и одна единица измерения. НЕ смешивайте системы измерения и единицы измерения. Желаемое решение: V0 = 2 мл * (1 л) / (1000 мл) = 0,002 л y0 = 30 мг / л * (1 г / л) / (1000 мг / л) = 0,03 г / л Исходные решения: y1 = 100 мг / л * (1 г / л) / (1000 мг / л) = 0,1 г / л -------------------------------- Сначала рассчитываем концентрацию желаемого раствора c0 = y (BSA) / M (BSA) c0 = 0.03 г / л / 66399 г / моль c0 = 4,51814e-007 моль / л Затем определяем концентрацию исходного (маточного) раствора c1 = y (BSA) / M (BSA) c1 = 0,1 г / л / 66399 г / моль c1 = 1,50605e-006 моль / л Поскольку общее количество растворенного вещества одинаково до и после разбавления, объем необходимого исходного раствора V1 = V0 * c0 / c1 V1 = 0,002 л * 4,51814e-007 моль / л / 1,50605e-006 моль / л V1 = 0,0006 л Чтобы преобразовать результат в желаемую единицу, мы снова воспользуемся анализом размеров. V (100 мг / л BSA) = 0.0006 л * (1000 мл) / (1 л) = 0,6 мл ПРОЦЕДУРА: ------------- Прежде всего, наполните мерную колбу примерно наполовину деионизированной водой, чтобы избежать бурные реакции. НИКОГДА не добавляйте воду в концентрированную кислоту. Выберите чистую пипетку подходящего размера и переложите жидкость в мерную колба. Когда весь раствор слился, прикоснитесь к кончику пипетки, чтобы сторона мерной колбы, позволяющая стечь остаткам жидкости. НЕ выдувайте оставшийся раствор. Дайте раствору нагреться до комнатной температуры, потому что мерная колба только точен при температуре, при которой он был откалиброван (обычно 20 ° C).Очень осторожно наполните колбу до отметки на горлышке колбы, используя капельницу пипеткой, чтобы добавить последние несколько миллилитров жидкости. Тщательно перемешайте раствор, переворачивая колбу и встряхивая. НИКОГДА не держите большие мерные колбы за горлышко. в одиночку - обеспечьте опору внизу. Перелейте приготовленный раствор в чистую сухую бутылку для хранения и промаркируйте ее. НИКОГДА хранить растворы в мерной колбе. ЗАМЕЧАНИЯ ПО БЕЗОПАСНОСТИ: ------------- - При приготовлении химических растворов всегда используйте соответствующее защитное оборудование.- Как правило, всегда добавляйте более концентрированный раствор в менее концентрированный раствор. - Со всеми химическими веществами, с которыми вы не знакомы, следует обращаться с особой осторожностью. и считается легковоспламеняющимся и токсичным. ОТКАЗ ОТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ: ------------- Используйте SolCalc на свой страх и риск! Если вы не понимаете результатов, НЕ используйте их. ======================= https://www.periodni.com 

.

Как разбавить кислотный пилинг | Сыворотки

транскрипция

Сегодня я собираюсь показать вам, как разбавлять кислоты.

Зачем вам разбавлять кислоту?

Часто кислота оказывается слишком сильной, и вам нужно сделать ее более мягкой, чтобы вы могли ее использовать. Я дам вам несколько советов, как чувствовать себя комфортно при этом.

В других случаях вы покупаете большое количество кислоты, зная, что вам придется разбавить ее перед нанесением.

Это выгодно, потому что вместо покупки нескольких процентов вы можете создать любой процент, который хотите использовать сегодня, и создать другой, когда будете использовать его в следующий раз.

Обо всем по порядку. Чем вы собираетесь разбавить кислоту?

Для большинства кислот можно использовать дистиллированную воду, но с бета-гидроксикислотой, такой как салициловая, вместо этого потребуется спирт. Мы рекомендуем 90%, которые легко доступны во многих аптеках.

Теперь не беспокойтесь о том, чтобы быть математиком.Мы пошли дальше и сделали все расчеты за вас в нашем Руководстве по пилингу. TCA 30% и Glycolic 70% имеют диаграммы разбавления.

Я приведу таблицу, чтобы показать вам доступное процентное соотношение каждого из них.

Что вам понадобится

  1. Таблица разбавления
  2. Отдельная емкость для смешивания
  3. Мерная посуда *, такая как ½ чайной ложки или, я лично предпочитаю пипетку… и…
  4. Если вы сделаете большую партию, вам понадобится контейнер для хранения нового процентного содержания кислоты.

Давайте начнем с разбавления этой 30% кислоты TCA. Я хочу сделать 15%, и это СУПЕР просто.

В моей диаграмме разбавления указано 1 часть 30 + 1 часть воды.

Так что мне просто нужно решить, какой будет моя «часть». В моем будет 1 полная капельница - ваша может быть какой угодно.

Я собираюсь поднять капельницу и набрать немного воды.

Теперь положите его в мой контейнер для смешивания.

Далее мне нужна еще одна капельница моего TCA. Теперь я просто добавляю это.

Мне нравится просто покрутить его несколько секунд и вуаля! Теперь у меня 15%, и я могу сделать пилинг.

Итак, давайте подумаем об этом. Если вы хотите сократить ЛЮБОЙ процент вдвое, вам просто нужно смешать равные части, и готово.

Давайте посложнее. Я собираюсь использовать 70% -ный гликолевый раствор и хочу получить 60%. Итак, я собираюсь взглянуть на свою диаграмму разбавления.

В нем указано 10 частей 70 + 2 части воды.

Теперь я не хочу использовать для этого полную капельницу, поэтому вместо этого я собираюсь использовать DROPS как свою «часть».

Теперь я собираюсь добавить в емкость 2 капли воды.

А потом 10 капель 70%.

Просто смешайте все вместе, и у вас есть 60%! Так просто.

Эй! … Может быть, 12 капель для меня недостаточно. Думаю, мне нужно больше. Так что все, что мне нужно сделать, это

Сделай это снова…

Я бы добавил еще 2 капли воды и еще 10 капель 70, и теперь у меня больше раствора.

Вот так лучше!

Сделайте столько, сколько вам нужно.Подумайте заранее, в следующий раз, если вы знаете, что вам нужно больше,

и удвойте рецепт. Сделайте 4 капли воды + 20 капель 70, чтобы насытиться. … Или утроить.

Я хочу воспользоваться моментом, чтобы упомянуть, как разбавить другие продукты, которые могут быть слишком сильными для вас.

Допустим, у вас ретинол 10%, и он слишком сильный. Как это разбавить?

Это очень просто.

Я бы посоветовал смешать его непосредственно с другим кремом или сывороткой. Когда вы это сделаете, вы разбавите его пополам.

Итак, я хочу сделать 1 дозу ретинола 10% + 1 дозу… .. всего, что у вас есть. Смешайте их в руках, а затем нанесите. Теперь у вас 0,05% ретинола. Так чертовски просто!

С другой стороны - если вы НЕ хотите разбавлять продукты - нанесите их отдельными слоями, чтобы они сохранили полную прочность.

Используйте эти полезные советы всякий раз, когда вам нужно разбавить то, что вы купили на нашем сайте.

Разбавьте кислоты дистиллированной водой.

Салициловый - особенный - разбавьте его спиртом.

Разбавляйте кремы и сыворотки другими кремами и сыворотками. Не используйте воду - вы можете добавить в свой продукт дополнительные бактерии или патогены. Всегда используйте сразу или храните в другом контейнере.

Разбавляйте масла другими маслами, но не водой или спиртом.

Посмотрите, как это было просто. Вы готовы начать разбавление сейчас? Если у вас остались вопросы, не стесняйтесь обращаться к нам - мы всегда готовы вам помочь!

.

Производное очищенного туберкулина белка, разведенная информация с сайта Drugs.com

APLISOL (Parkedale)
(производное туберкулина, очищенное, разбавленное [стабилизированный раствор])
Диагностический антиген
Только для внутрикожных инъекций

Описание

Аплизол (туберкулин PPD, разбавленный) представляет собой стерильный водный раствор очищенной белковой фракции для внутрикожного введения в качестве вспомогательного средства в диагностике туберкулеза. Раствор стабилизирован полисорбатом (Tween) 80, забуферен фосфатами калия и натрия и содержит примерно 0.35% фенол в качестве консерванта. Этот продукт готов к немедленному использованию без дальнейшего разбавления.

Очищенная белковая фракция выделяется из фильтрата питательных сред человека штамма Mycobacterium tuberculosis методом F.B. Зайберт. 1,2 Туберкулин PPD, разбавленный, получают из Tuberculin PPD Powder Master Lot 154616, который клинически биоэквивалентен по активности стандартному PPD-S * (5 TU ** на 0,1 мл) Службы общественного здравоохранения США, Национальные центры для контроля заболеваний.Этот продукт изготовлен из одной эталонной партии (№ 154616), чтобы исключить вариации от партии к партии, присущие производству.

Активность каждой партии разведенного туберкулина PPD определяют на сенсибилизированных морских свинках.

Клиническая фармакология

В Соединенных Штатах распространенность инфекции Mycobacterium tuberculosis и активного заболевания варьирует для разных слоев населения; однако риск заражения M. tuberculosis среди населения в целом невелик.Заболеваемость туберкулезом (ТБ) в Соединенных Штатах неуклонно снижалась на протяжении десятилетий. Однако в 1985 году заболеваемость туберкулезом стабилизировалась и впоследствии увеличилась в течение 1992 года, что сопровождалось увеличением смертности от туберкулеза на 14% в 1988 году. Это было связано с рядом сложных социальных и медицинских факторов, включая эпидемию вируса иммунодефицита человека (ВИЧ). , заболеваемость туберкулезом у лиц, родившихся за границей из стран с высокой распространенностью туберкулеза, появление штаммов туберкулеза с лекарственной устойчивостью и передача M.tuberculosis в местах скопления людей. (например, медицинские учреждения, исправительные учреждения, наркологические центры и приюты для бездомных). Поскольку общий риск заражения M. tuberculosis низок для всего населения США, основная стратегия профилактики и борьбы с туберкулезом в США заключается в минимизации риска передачи путем раннего выявления и лечения пациентов с активным инфекционным туберкулезом, поиск и скрининг лиц, которые контактировали с больными активным заразным туберкулезом, и скрининг групп высокого риска.

Tuberculin PPD рекомендован Американской ассоциацией легких в качестве средства выявления инфекции, вызываемой Mycobacterium tuberculosis . 3,4 После заражения человека микобактериями Т-лимфоциты размножаются и становятся сенсибилизированными. Эти сенсибилизированные Т-клетки попадают в кровоток и циркулируют в течение месяцев или лет. Этот процесс сенсибилизации происходит в основном в регионарных лимфатических узлах и может развиться через 2-10 недель после заражения. После приобретения чувствительность к туберкулину имеет тенденцию сохраняться, хотя она часто ослабевает со временем и с возрастом.Введение туберкулина в кожу стимулирует лимфоциты и активирует серию событий, ведущих к реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). Этот ответ называется «отсроченным», потому что реакция становится очевидной через несколько часов после инъекции. Кожная реактивность включает расширение сосудов, отек и инфильтрацию лимфоцитов, базофилов, моноцитов и нейтрофилов в место инъекции антигена. Антиген-специфические Т-лимфоциты пролиферируют и высвобождают лимфокины, которые опосредуют накопление других клеток в этом месте.Площадь уплотнения отражает активность DTH. 5 У большинства лиц, чувствительных к туберкулину, реакция гиперчувствительности замедленного типа проявляется через 5-6 часов после проведения туберкулиновой кожной пробы и длится максимум 48-72 часа. У гериатрических пациентов или пациентов, впервые получающих туберкулиновую кожную пробу, реакция может развиваться медленнее и может быть максимальной только через 72 часа. 6 Из-за незрелости их иммунной системы многие новорожденные и дети младше 6 недель инфицированы M.tuberculosis , вообще не реагируют на туберкулиновые пробы. 5

В месте инъекции могут возникать немедленные эритематозные реакции или реакции гиперчувствительности к туберкулину или компонентам разбавителя.

Возможное снижение чувствительности к кожным пробам может происходить при наличии туберкулезных инфекций, включая вирусные инфекции, вакцинацию живым вирусом, подавляющую форму туберкулеза, другие бактериальные инфекции, лекарства и злокачественные новообразования.

Результаты кожной пробы с туберкулином также менее надежны, поскольку количество CD4 снижается у ВИЧ-инфицированных. 3

Доза туберкулина PPD для внутрикожного введения (Манту) 5 ЕД рекомендуется в качестве стандартного туберкулинового теста, а туберкулин PPD рекомендован Американской ассоциацией легких в качестве средства выявления инфекции, вызываемой Mycobacterium tuberculosis . Реакции на пробу Манту интерпретируются на основе количественного измерения ответа на определенную дозу (5 TU PPD-S или эквивалент) Tuberculin PPD. 7

Чтобы определить, что Tuberculin PPD Master Lot 154616 клинически биоэквивалентен по активности стандартному 5TU PPD-S *, было проведено 3 исследования зависимости реакции от дозы в следующих популяциях (1) люди с анамнезом бактериологически подтвержденного ТБ; (2) здоровые добровольцы в географическом регионе с низкой эндемичностью по атипичной микобактериальной инфекции; и (3) здоровые добровольцы в географическом районе с высокой эндемичностью атипичной микобактериальной инфекции.

Показания и использование

Tuberculin PPD рекомендован Американской ассоциацией легких в качестве средства выявления инфекции, вызываемой Mycobacterium tuberculosis . В стандартной рекомендованной туберкулиновой пробе используется внутрикожная проба (Манту) с использованием дозы туберкулина PPD 5 ТЕ. 7 Тестовая доза аплизола 0,1 мл (туберкулин PPD, разбавленный) эквивалентна дозе 5 TU, рекомендованной клинически установленной и стандартизированной с PPD-S. Туберкулиновая кожная проба не противопоказана лицам, вакцинированным БЦЖ, и результаты кожной пробы таких лиц используются для подтверждения или исключения диагноза M.туберкулез инфекций. 4 ВИЧ-инфекция - серьезный фактор риска развития туберкулеза у лиц, инфицированных туберкулезом. Все ВИЧ-инфицированные должны пройти кожную пробу на PPD-туберкулин. 3

Противопоказания

Аплизол противопоказан пациентам с известной гиперчувствительностью или аллергией на аплизол или любой из его компонентов. Аплизол не следует назначать лицам, которые ранее испытывали тяжелую реакцию (например, везикуляцию, изъязвление или некроз) из-за серьезности реакций, которые могут возникнуть на участке исследования.

Предупреждения

Аплизол не следует назначать лицам, у которых ранее наблюдались тяжелые реакции (например, везикуляция, изъязвление или некроз) из-за серьезности реакций, которые могут возникнуть на участке испытания (см. ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ ).

Не у всех инфицированных будет реакция гиперчувствительности замедленного типа на туберкулиновую пробу. Сообщалось, что ряд факторов вызывает снижение способности реагировать на туберкулиновый тест, например наличие туберкулезной инфекции или вирусных инфекций (корь, эпидемический паротит, ветряная оспа и ВИЧ), вакцинация живыми вирусами (корь, эпидемический паротит, краснуха и т. оральный полиомиелит и желтая лихорадка), всесторонний туберкулез, другие бактериальные инфекции, лекарства (кортикостероиды и другие иммунодепрессанты) и злокачественные новообразования. 8,9

Любое состояние, которое ослабляет или ослабляет клеточный иммунитет, потенциально может вызвать ложноотрицательную реакцию.

Результаты кожной туберкулиновой пробы менее надежны у ВИЧ-инфицированных, поскольку количество CD4 снижается (см. КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ ). 3

Избегайте подкожного введения туберкулина. В этом случае местная реакция не развивается, но у высокочувствительных людей может возникнуть общая фебрильная реакция и / или острое воспаление вокруг старых туберкулезных поражений.

Меры предосторожности

Общие

Прогностическая ценность туберкулиновой кожной пробы зависит от распространенности инфекции M. tuberculosis и относительной распространенности перекрестных реакций с нетуберкулезными микобактериями. 9,10

Для каждого пациента следует использовать отдельный стерильный одноразовый шприц и иглу, чтобы предотвратить возможную передачу вируса гепатита в сыворотке крови и других инфекционных агентов от одного человека к другому.

Следует проявлять особую осторожность, чтобы продукт вводился внутрикожно, а не в кровеносный сосуд.

Перед введением аплисола необходимо изучить историю болезни пациента на предмет возможной гиперчувствительности немедленного типа к продукту, определить предыдущее использование аплизола и наличие каких-либо противопоказаний к тесту (см. ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ ).

Как и любой другой биологический продукт, эпинефрин должен быть доступен немедленно в случае возникновения анафилактоидной реакции или острой реакции гиперчувствительности.

Несоблюдение рекомендаций по хранению и обращению с Аплизолом может привести к потере активности и получению неточных результатов. 11,8

Реактивность к тесту может подавляться или подавляться на срок до 5-6 недель у людей после иммунизации определенными живыми вирусными вакцинами, вирусных инфекций или прекращения приема кортикостероидов или иммунодепрессантов. 8,9

Информация для пациентов

Пациенты должны быть проинструктированы сообщать о побочных эффектах, таких как везикуляция, изъязвление или некроз, которые могут возникнуть на участке тестирования у высокочувствительных людей.Пациенты должны быть проинформированы о том, что в месте инъекции могут возникать боль, зуд и дискомфорт.

Пациента следует проинформировать о необходимости вернуться к своему врачу или поставщику медицинских услуг для ознакомления с результатами анализа, а также о необходимости вести личный учет прививок.

Лекарственные взаимодействия

У пациентов, получающих кортикостероиды или иммунодепрессанты, реактивность на тест может быть снижена или подавлена. Эта пониженная реактивность может сохраняться в течение 5-6 недель после прекращения терапии (см. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ - Общие ). 9

Реактивность к PPD может быть временно снижена некоторыми живыми вирусными вакцинами. Следовательно, если необходимо провести туберкулиновый тест, его следует проводить либо до, либо одновременно с применением пероральной вакцины против полиомиелита и / или инъекции вакцины против кори, эпидемического паротита и краснухи в комбинированной форме или в виде отдельных антигенов, либо тестирование следует отложить на 4-6 недель. 10

Канцерогенез, мутагенез, нарушение фертильности

Не проводились долгосрочные исследования на животных или людях для оценки канцерогенного или мутагенного потенциала или воздействия аплизола на фертильность.

Беременность

Тератогенные эффекты: Беременность категории C. Исследования репродукции животных с Аплизолом не проводились. Также неизвестно, может ли Аплизол причинить вред плоду при введении беременной женщине или может повлиять на репродуктивную способность. Аплизол следует давать беременной женщине только в случае крайней необходимости.

Однако риск нераспознанного туберкулеза и послеродовой контакт между матерью с активным заболеванием и младенцем подвергает младенца серьезной опасности туберкулеза и таких осложнений, как туберкулезный менингит.Несмотря на то, что не было зарегистрировано каких-либо побочных эффектов для плода, вызванного кожным тестом на туберкулез, лечащий врач захочет рассмотреть, перевешивают ли потенциальные выгоды возможные риски проведения туберкулинового теста у беременной женщины или женщины детородного возраста. возраст, особенно в определенных группах высокого риска.

Туберкулиновая кожная проба считается действительной и безопасной на протяжении всей беременности. 3

Побочные реакции

У высокочувствительных людей на участке тестирования могут возникать сильно положительные реакции, включая образование пузырьков, изъязвление или некроз; однако за период с 1995 по 1998 год сообщений об этих реакциях не поступало.Холодные компрессы или местные стероидные препараты могут использоваться для облегчения симптомов боли, зуда и дискомфорта.

Сильно положительные результаты теста могут привести к образованию рубцов на участке тестирования.

В месте инъекции могут возникнуть немедленные эритематозные или другие реакции.

Способ применения и дозы

Флаконы с аплизолом перед введением следует проверить визуально на предмет наличия твердых частиц и обесцвечивания и выбросить их, если они обнаружены.Флаконы, использованные более 30 дней, следует выбросить.

Стандартный метод (проба Манту)

Проба Манту выполняется внутрикожно, вводится шприцем и иглой точно 0,1 мл аплизола. Результат считывается через 48–72 часа, и при интерпретации теста учитывается только уплотнение . Индурация - это твердый приподнятый участок с четко определенными краями в месте инъекции и вокруг него. В месте инъекции может развиться эритема, но она не имеет диагностического значения.Стандартный тест выполняется следующим образом:

  1. Участком теста обычно является сгибательная или дорсальная поверхность предплечья примерно на 4 дюйма ниже локтя. Могут использоваться другие участки кожи, но предпочтительна сгибательная поверхность предплечья. Использование участка кожи без повреждений и подальше от вен рекомендуется 7
  2. Кожу в месте инъекции промывают 70% спиртом и дают высохнуть.
  3. Исследуемый материал вводится туберкулиновым шприцем (0.5 или 1,0 мл) с короткой (1/2 дюйма) иглой 26 или 27 калибра.
  4. Для каждого пациента следует использовать отдельный стерильный одноразовый шприц и иглу.
  5. Диафрагму пробки флакона следует протереть 70% спиртом.
  6. Игла вводится через стопорную диафрагму перевернутого флакона. Шприц наливают ровно 0,1 мл, при этом стараются исключить пузырьки воздуха и поддерживать наполнение просвета иглы.
  7. Острие иглы вводится в самые поверхностные слои кожи кончиком иглы вверх. Когда вводится раствор туберкулина, бледный пузырек размером от 6 до 10 мм (1/3 дюйма) поднимается над острием иглы. Он быстро впитывается, и повязка не требуется.

В случае, если инъекция вводится подкожно (т. Е. Пузырь не образуется) или если значительная часть дозы просачивается из места инъекции, тест следует немедленно повторить в другом месте, по крайней мере, на 5 см (2 дюйма) удалено.

Проба Манту является эталоном для сравнения всех других туберкулиновых проб.

Интерпретация туберкулиновой реакции

Показания реакции Манту следует снимать в период от 48 до 72 часов после инъекции. При интерпретации теста следует учитывать только индукцию. Диаметр уплотнения следует измерять поперек длинной оси предплечья и записывать в миллиметрах. Эритема не имеет диагностической ценности и не должна приниматься во внимание. Присутствие и размер некроза и отека, если они есть, должны быть зарегистрированы, но не используются при интерпретации теста.При отсутствии уплотнения площадь эритемы более 10 мм в диаметре может указывать на то, что инъекция была сделана слишком глубоко, и показано повторное исследование.

Реакции следует интерпретировать следующим образом:

Положительный - Положительная реакция на туберкулиновую кожную пробу может проявиться только через 2-10 недель после заражения. 7 Исходя из текущих руководств, 3,12 интерпретация положительных реакций (в зависимости от возраста, иммунного статуса или факторов риска испытуемых) составляет:

1.Индурация> 5 мм классифицируется следующим образом:

  • Лица, недавно имевшие тесный контакт с больными активной формой ТБ;
  • Лица, инфицированные вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) или имеющие факторы риска ВИЧ-инфекции, но ВИЧ-статус неизвестен;
  • Лица, у которых рентгенограммы фиброзной грудной клетки соответствуют излеченному туберкулезу.

2. уплотнение> 10 мм классифицируется как положительное у всех лиц, которые не соответствуют ни одному из вышеперечисленных критериев, но принадлежат к одной или нескольким из следующих групп с высоким риском ТБ:

  • Потребители инъекционных наркотиков, о которых известно, что они серонегативны по ВИЧ;
  • Лица, у которых есть другие заболевания, которые, как сообщалось, повышают риск перехода от латентной инфекции ТБ к активной форме ТБ.Эти медицинские состояния включают сахарный диабет, состояния, требующие продолжительной терапии высокими дозами кортикостероидов и другой иммуносупрессивной терапии (включая трансплантацию костного мозга и органов), хроническую почечную недостаточность, некоторые гематологические нарушения (например, лейкемии и лимфомы), другие специфические злокачественные новообразования (например, карцинома). головы или шеи), потеря веса более чем на 10% ниже идеальной, силикоз, гастрэктомия, обход тощей кишки;
  • Жители и сотрудники мест скопления повышенного риска; тюрьмы и тюрьмы, дома престарелых и другие учреждения длительного пребывания для престарелых, медицинские учреждения (включая некоторые психиатрические учреждения интернатного типа) и приюты для бездомных;
  • Недавно прибывшие иностранцы (т.д., в течение последних 5 лет) из стран с высокой распространенностью или заболеваемостью ТБ;
  • Некоторые группы населения с низким доходом, не получающие медицинского обслуживания, включая сельскохозяйственных рабочих-мигрантов и бездомных;
  • Расовые или этнические меньшинства высокого риска по определению на местном уровне;
  • Дети младше 4 лет или младенцы, дети и подростки, контактирующие со взрослыми из категорий высокого риска.

3. Индурация> 15 мм считается положительной у лиц, не отвечающих ни одному из вышеперечисленных критериев.

Отрицательный - Индурация менее 5 мм. Это указывает на отсутствие гиперчувствительности к туберкулезу и туберкулезная инфекция маловероятна.

Booster Effect - Заражение человека туберкулезными палочками или другими микобактериями или вакцинация БЦЖ приводит к замедленной реакции гиперчувствительности на туберкулин, что подтверждается кожной пробой. Отсроченная реакция гиперчувствительности может постепенно уменьшаться в течение нескольких лет. Если человек в это время проходит туберкулиновую пробу, значительной реакции может не выявиться.Однако стимул теста может усилить или увеличить размер реакции на второй тест, иногда вызывая явное преобразование или развитие чувствительности. Этот усиливающий эффект можно увидеть на втором тесте, проведенном через неделю после первоначального стимулирующего теста, и он может сохраняться в течение года, а возможно, и дольше. Когда проводится рутинное периодическое туберкулиновое тестирование взрослых, сначала следует рассмотреть возможность двухэтапного тестирования, чтобы свести к минимуму вероятность интерпретации усиленной реакции как конверсии. 13,14

Следует отметить, что реактивность к туберкулину может подавляться или подавляться на срок до 5-6 недель вирусными инфекциями, живыми вирусными вакцинами (например, корью, оспой, полиомиелитом, краснухой и эпидемическим паротитом) или после прекращения терапии кортикостероидами. или иммунодепрессанты. Недоедание также может иметь аналогичный эффект. Если это имеет диагностическое значение, отрицательный тест следует рассматривать как доказательство отсутствия гиперчувствительности только после того, как будет продемонстрирована нормальная реактивность на неспецифические раздражители.Первичная инъекция туберкулина может, возможно, оказать стимулирующее действие на последующие туберкулиновые реакции. Педиатрический пациент, который, как известно, контактировал с больным туберкулезом, не должен считаться благополучным до тех пор, пока у этого пациента не появится отрицательная туберкулиновая реакция, по крайней мере, через десять недель после прекращения контакта с больным туберкулезом. 15 Ежегодное тестирование обычно рекомендуется для педиатрических пациентов из групп высокого риска, таких как люди из стран с высокой распространенностью туберкулеза и групп с низким доходом. 16

Положительная реакция на туберкулин не обязательно означает наличие активного заболевания. Дальнейшие диагностические процедуры (например, рентгенография грудной клетки, мазок мокроты и / или исследование посева) должны быть выполнены до постановки диагноза туберкулеза. Небольшой процент респондентов мог быть инфицирован не M. tuberculosis , а некоторыми другими микобактериями. Отрицательный туберкулиновый кожный тест никогда не должен использоваться для исключения возможности активного туберкулеза у лиц, для которых рассматривается диагноз (симптомы, совместимые с туберкулезом).

Как поставляется

Туберкулин PPD-Aplisol, биоэквивалентный 5 единицам США (TU) PPD-S на тестовую дозу (0,1 мл) доступен в следующих презентациях:

НДЦ 64029-4525-1 (Био. 1525)

1 мл (10 тестов) - флакон с резиновой диафрагмой

НДЦ 64029-4525-2 (Биография. 1607)

5 мл (50 тестов) - флакон с резиновой диафрагмой

Этот продукт готов к использованию без дальнейшего разбавления.

Хранилище

НЕ ЗАМЕРЗАТЬ

Этот продукт следует хранить при температуре 2–8 ° C (36–46 ° F) в защищенном от света месте.

Флаконы, используемые более 30 дней, следует выбросить из-за возможного окисления и разложения, которые могут повлиять на эффективность.

Список литературы

1 Зайберт, ФБР: Am Rev Tuberc, 30: 713, 1934

2 Зайберт, Ф. Б., и Гленн, Дж. Т .: Am Rev Tuberc, 44: 9, 1941

3 MMWR, 1995: 44 RR-11

4 MMWR, 1996: 45 RR-4

5 Huebner RE, Shein MF, Bass JB, The Tuberculin Skin Test, Clin Infect Dis , 1993; 17: 968-75

6 AHFS Drug Information, 1997, 36:84 стр. 1962-1968

7 Американское торакальное общество: диагностические стандарты и классификация туберкулеза, 1990 Am Rev Respir Dis, 142: 725-735

8 Am Rev Respir Dis, 1985; 886

9 Brickman HF et.Al., Время проведения туберкулиновых тестов в связи с иммунизацией живыми вирусными вакцинами, Pediatrics ; 1975; 55: 392

.

10 Отчет Комитета по инфекционным заболеваниям в Красной книге, (1994)

11 Landi S, Held HR, Стабильность разбавленного раствора очищенного производного туберкулина при экстремальных температурах, J Biol Stand , 1981; 9: 195

12 Диагностика туберкулеза и туберкулеза, Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC), 21 марта 1996 г., документ № 2250102

13 Сьюэлл Э.М., О'Хара, Д., Кендиг, Э.Л., младший: Туберкулиновый тест, Педиатрия, Том 54, № 5, ноябрь 1974 г.

14 Консультативный комитет по ликвидации туберкулеза (ACET / CDC: Профилактика и борьба с туберкулезом в учреждениях, обеспечивающих длительный уход за престарелыми, 1990 г. MMWR 39 (10): 7-13,15.

15 ACET (CDC): Использование профилактической терапии туберкулезной инфекции в Соединенных Штатах, 1990. MMWR 39 (8): 9-12.

16 ACET (CDC): Скрининг на туберкулез и туберкулезную инфекцию в группах высокого риска.Рекомендации ACET, 1990, MMWR 39 (8): 1-7.

Только Rx.

Информация о назначении на май 2002 г.

ПАРКЕДЕЙЛ

ФАРМАЦЕВТИКА

Изготовитель:

Parkedale Pharmaceuticals, Inc.

Рочестер, Мичиган 48307

4525G320

ФОТО ТОВАРА (И):
ПРИМЕЧАНИЕ. Эти фотографии можно использовать только для идентификации по форме, цвету и отпечатку.Они не отображают фактический размер или относительный размер .

Представленные здесь образцы продукции предоставлены производителем. Несмотря на то, что были приложены все усилия для обеспечения точного воспроизведения, помните, что любую визуальную идентификацию следует рассматривать как предварительную. В случае отравления или подозрения на передозировку идентичность препарата следует проверить с помощью химического анализа.


Дополнительная информация

Всегда консультируйтесь со своим врачом, чтобы убедиться, что информация, отображаемая на этой странице, применима к вашим личным обстоятельствам.

Заявление об отказе от ответственности за медицинское обслуживание

.

Обзор анализа белок-белкового взаимодействия | Thermo Fisher Scientific

Белки контролируют все биологические системы в клетке, и хотя многие белки выполняют свои функции независимо, подавляющее большинство белков взаимодействуют с другими для обеспечения надлежащей биологической активности. Характеристика белок-белковых взаимодействий с помощью таких методов, как коиммунопреципитация (ко-IP), анализ методом «pull-down», перекрестное связывание, перенос метки и дальневестерн-блот-анализ имеет решающее значение для понимания функции белка и биологии клетки.

Посмотреть все продукты для анализа взаимодействия белков


Введение в белок-белковые взаимодействия

Белки - это рабочие лошадки, которые облегчают большинство биологических процессов в клетке, включая экспрессию генов, рост клеток, пролиферацию, поглощение питательных веществ, морфологию, подвижность, межклеточную коммуникацию и апоптоз.Но клетки реагируют на множество стимулов, и поэтому экспрессия белка - динамический процесс; белки, которые используются для выполнения определенных задач, не всегда могут быть экспрессированы или активированы. Кроме того, не все клетки равны, и многие белки экспрессируются в зависимости от типа клетки. Эти основные характеристики белков предполагают сложность, которую может быть трудно исследовать, особенно при попытке понять функцию белка в надлежащем биологическом контексте.

Критические аспекты, необходимые для понимания функции белка, включают:

  • Последовательность и структура белка - используется для обнаружения мотивов, которые предсказывают функцию белка
  • История эволюции и консервативные последовательности - идентифицирует ключевые регуляторные остатки
  • Профиль экспрессии - выявляет специфичность клеточного типа и то, как регулируется экспрессия
  • Посттрансляционные модификации - фосфорилирование, ацилирование, гликозилирование и убиквитинирование предполагают локализацию, активацию и / или функцию
  • Взаимодействие с другими белками - функция может быть экстраполирована, зная функцию партнеров по связыванию
  • Внутриклеточная локализация - может указывать на функцию белка

До конца 1990-х годов анализ функции белков в основном фокусировался на отдельных белках.Однако, поскольку большинство белков взаимодействуют с другими белками для правильного функционирования, их следует изучать в контексте их взаимодействующих партнеров, чтобы полностью понять их функцию. С публикацией генома человека и развитием области протеомики понимание того, как белки взаимодействуют друг с другом и идентификация биологических сетей, стало жизненно важным для понимания того, как белки функционируют внутри клетки.

Справочник по приготовлению белков

Узнайте больше о том, как обессоливать, заменять буфер, концентрировать и / или удалять загрязняющие вещества из образцов белка, иммунопреципитации и других методах очистки и очистки белков с помощью различных инструментов биологии белков Thermo Scientific в этом 32-страничном справочнике.

  • Иммунопреципитация (IP), co-IP и хроматин-IP
  • Теги очистки рекомбинантного белка
  • Надежно диализируйте образцы белка с помощью диализных кассет и устройств Slide-A-Lyzer
  • Быстрое обессоливание образцов с высоким извлечением белка с использованием спиновых обессоливающих колонн и пластин Zeba
  • Эффективно удаляет определенные загрязнения с помощью смол, оптимизированных для удаления моющих средств или эндотоксинов
  • Концентрируйте разбавленные образцы белка быстро с помощью концентраторов белка Pierce
protein-prep-handbook

Типы белок-белковых взаимодействий

Белковые взаимодействия принципиально характеризуются как стабильные или временные, и оба типа взаимодействия могут быть сильными или слабыми.Стабильные взаимодействия связаны с белками, очищенными как мульти-субъединичные комплексы, и субъединицы этих комплексов могут быть идентичными или разными. Гемоглобин и ядерная РНК-полимераза являются примерами мульти-субъединичных взаимодействий, которые образуют стабильные комплексы.

Ожидается, что временные взаимодействия будут контролировать большинство клеточных процессов. Как следует из названия, временные взаимодействия носят временный характер и обычно требуют набора условий, которые способствуют взаимодействию, таких как фосфорилирование, конформационные изменения или локализация в отдельных областях клетки.Временные взаимодействия могут быть сильными или слабыми, быстрыми или медленными. Находясь в контакте со своими партнерами по связыванию, временно взаимодействующие белки участвуют в широком спектре клеточных процессов, включая модификацию белков, транспорт, фолдинг, передачу сигналов, апоптоз и клеточный цикл. Следующий пример представляет собой иллюстрацию белковых взаимодействий, которые регулируют апоптотические и антиапоптотические процессы.


Тяжелое белок-белковое взаимодействие BAD. Панель A: окрашенный кумасси гель SDS-PAGE рекомбинантного легкого и тяжелого BAD-GST-HA-6xHIS, очищенный из лизатов HeLa IVT (L) с использованием тандемного сродства глутатионовой смолы (E1) и кобальтовой смолы (E2). Указан расход (FT) из каждого столбца. Панель B: Схема фосфорилирования BAD и белковых взаимодействий во время выживания и гибели клеток (то есть апоптоза). Панель C: покрытие последовательности белка BAD, показывающее идентифицированные сайты консенсусного фосфорилирования Akt (красный прямоугольник). Панель D: МС-спектры меченного стабильным изотопом BAD пептида HSSYPAGTEDDEGmGEEPSPFr.


Белки связываются друг с другом посредством комбинации гидрофобных связей, сил Ван-дер-Ваальса и солевых мостиков в специфических связывающих доменах каждого белка. Эти домены могут быть небольшими связывающими щелями или большими поверхностями и могут состоять всего из нескольких пептидов или состоять из сотен аминокислот. На силу связывания влияет размер связывающего домена. Одним из примеров общего поверхностного домена, который способствует стабильным межбелковым взаимодействиям, является лейциновая застежка-молния, которая состоит из α-спиралей на каждом белке, которые связываются друг с другом параллельным образом посредством гидрофобного связывания регулярно расположенных остатков лейцина на каждом α -спираль, которая выступает между соседними спиральными пептидными цепями.Из-за плотной молекулярной упаковки лейциновые молнии обеспечивают стабильное связывание для мультибелковых комплексов, хотя все лейциновые молнии не связываются одинаково из-за нелейциновых аминокислот в α-спирали, которые могут уменьшить молекулярную упаковку и, следовательно, прочность соединения. взаимодействие.

Два гомологичных домена Src (SH), Sh3 и Sh4, являются примерами общих временных связывающих доменов, которые связывают короткие пептидные последовательности и обычно обнаруживаются в сигнальных белках. Домен Sh3 распознает пептидные последовательности с фосфорилированными остатками тирозина, которые часто указывают на активацию белка.Домены Sh3 играют ключевую роль в передаче сигналов рецептора фактора роста, во время которой лиганд-опосредованное фосфорилирование рецептора по остаткам тирозина привлекает нижестоящие эффекторы, которые распознают эти остатки через их домены Sh3. Домен Sh4 обычно распознает богатые пролином пептидные последовательности и обычно используется киназами, фосфолипазами и GTPases для идентификации белков-мишеней. Хотя оба домена Sh3 и Sh4 обычно связываются с этими мотивами, специфичность различных белковых взаимодействий диктуется соседними аминокислотными остатками в соответствующем мотиве.


Биологические эффекты белок-белковых взаимодействий

Результат двух или более белков, которые взаимодействуют с определенной функциональной целью, можно продемонстрировать несколькими различными способами.Измеримые эффекты белковых взаимодействий описаны следующим образом:

  • Изменять кинетические свойства ферментов, что может быть результатом незначительных изменений связывания субстрата или аллостерических эффектов
  • Обеспечение канализации субстрата путем перемещения субстрата между доменами или субъединицами, что в конечном итоге приводит к желаемому конечному продукту
  • Создать новый сайт связывания, как правило, для малых эффекторных молекул
  • Инактивировать или разрушить белок
  • Изменение специфичности белка в отношении его субстрата посредством взаимодействия с различными партнерами по связыванию, e.g., продемонстрировать новую функцию, которую ни один белок не может проявлять по отдельности.
  • Выполнять регулирующую роль в восходящем или нисходящем событии

Общие методы анализа белок-белковых взаимодействий

Обычно для проверки, характеристики и подтверждения белковых взаимодействий требуется сочетание методов.Ранее неизвестные белки могут быть обнаружены по их ассоциации с одним или несколькими известными белками. Анализ взаимодействия белков может также выявить уникальные, непредвиденные функциональные роли хорошо известных белков. Открытие или проверка взаимодействия - это первый шаг на пути к пониманию того, где, как и при каких условиях эти белки взаимодействуют in vivo и функциональные последствия этих взаимодействий.

Хотя различных методов и подходов к изучению межбелковых взаимодействий слишком много, чтобы описать их здесь, в таблице ниже и оставшейся части этого раздела основное внимание уделяется общим методам анализа межбелковых взаимодействий и типам взаимодействий, которые можно изучить с использованием каждого метод.Таким образом, стабильные белок-белковые взаимодействия проще всего выделить физическими методами, такими как коиммунопреципитация и анализ методом pull-down, поскольку белковый комплекс не распадается с течением времени. Слабые или временные взаимодействия можно идентифицировать с помощью этих методов, сначала ковалентно сшивая белки, чтобы заморозить взаимодействие во время co-IP или pull-down. Альтернативно, перекрестное сшивание, наряду с переносом метки и анализом дальнего вестерн-блоттинга, можно проводить независимо от других методов для идентификации межбелковых взаимодействий.

Общие методы анализа различных типов белковых взаимодействий

Метод Белковые взаимодействия
Коиммунопреципитация (co-IP) Стабильный или прочный
Нисходящий анализ Стабильный или прочный
Анализ взаимодействия сшивающего белка Кратковременный или слабый
Анализ взаимодействия белков переноса метки Кратковременный или слабый
Дальневосточный блот-анализ Умеренно стабильный

Коиммунопреципитация (ко-IP)

Коиммунопреципитация (co-IP) - популярный метод обнаружения взаимодействия белков.Co-IP проводится по существу так же, как иммунопреципитация (IP) одного белка, за исключением того, что целевой белок, осажденный антителом, также называемый «приманкой», используется для соосаждения комплекса связывающий партнер / белок. , или «добыча», из лизата. По существу, взаимодействующий белок связывается с антигеном-мишенью, который связывается антителом, иммобилизованным на подложке. Иммунопреципитированные белки и их партнеры по связыванию обычно обнаруживаются электрофорезом в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE) и вестерн-блоттингом.Предположение, которое обычно делается при соосаждении связанных белков, состоит в том, что эти белки связаны с функцией антигена-мишени на клеточном уровне. Однако это только предположение, которое подлежит дальнейшей проверке.

Совместная иммунопреципитация циклина B и Cdk1 . Магнитные гранулы Thermo Scientific Pierce Protein A / G связываются с антителом Cdk1 в комплексе с Cdk1. Циклин B связан с Cdk1 и захватывается вместе со своим партнером по связыванию.


Анализ

Pull-down схож по методологии с коиммунопреципитацией, поскольку для очистки взаимодействующих белков используется подложка из гранул. Однако разница между этими двумя подходами заключается в том, что в то время как co-IP использует антитела для захвата белковых комплексов, в методах «pull-down» используется белок «приманка» для очистки любых белков в лизате, которые связываются с приманкой.Нисходящие анализы идеальны для изучения сильных или стабильных взаимодействий или тех, для которых нет антител для коиммунопреципитации.

Общая схема анализа методом выпадающего списка. Нисходящий анализ представляет собой мелкомасштабную методику аффинной очистки, аналогичную иммунопреципитации, за исключением того, что антитело заменяется какой-либо другой системой аффинности. В этом случае аффинная система состоит из глутатион-S-трансферазы (GST), белка или связывающего домена, меченного полигис- или стрептавидином, который захватывается глутатионом, хелатом металла (кобальт или никель) или покрытыми биотином агарозными шариками. соответственно.Иммобилизованный белок, меченный слиянием, действует как «приманка» для захвата предполагаемого партнера по связыванию (т.е. «жертвы»). В типичном нисходящем анализе иммобилизованный белок-приманка инкубируется с клеточным лизатом, и после предписанных этапов промывки комплексы выборочно элюируются с использованием конкурентных аналитов или буферов с низким pH или восстанавливающих буферов для анализа в геле или вестерн-блоттинга.


Анализ взаимодействия сшивающего белка

Большинство белок-белковых взаимодействий являются временными, лишь кратковременно происходящими как часть единственного каскада или другой метаболической функции внутри клеток.Сшивание взаимодействующих белков - это подход к стабилизации или постоянному соединению компонентов комплексов взаимодействия. После того, как компоненты взаимодействия ковалентно сшиты, другие стадии (например, лизис клеток, аффинная очистка, электрофорез или масс-спектрометрия) могут быть использованы для анализа взаимодействия белок-белок при сохранении исходного взаимодействующего комплекса.

Гомобифункциональные аминореактивные сшивающие агенты могут быть добавлены к клеткам для сшивания потенциально взаимодействующих белков вместе, которые затем могут быть проанализированы после лизиса с помощью вестерн-блоттинга.Сшивающие агенты могут быть мембранопроницаемыми, такими как DSS, для сшивания внутриклеточных белков, или они могут быть непроницаемыми для мембраны, такими как BS3, для сшивания белков клеточной поверхности. Кроме того, некоторые сшивающие агенты могут быть расщеплены восстанавливающими агентами, такими как DSP или DTSSP, для обращения сшивок.

В качестве альтернативы, гетеробифункциональные сшивающие агенты, которые содержат фотоактивируемую группу, такие как продукт SDA или Sulfo-SDA, могут быть использованы для захвата временных взаимодействий, которые могут происходить, например, после определенного стимула.Фотоактивация также может происходить после метаболического мечения фотоактивируемыми аминокислотами, такими как L-фото-лейцин или L-фото-метионин.

Сайты сшивания между белками могут быть картированы с высокой точностью с помощью масс-спектрометрии, особенно если используется расщепляемый МС сшивающий агент, такой как DSSO или DSBU.


Анализ взаимодействия белков переноса меток

Перенос метки включает сшивание взаимодействующих молекул (т.е.е., белки приманки и жертвы) с меченым сшивающим агентом, а затем расщепляют связь между приманкой и добычей, так что метка остается прикрепленной к жертве. Этот метод особенно ценен из-за его способности идентифицировать белки, которые слабо или временно взаимодействуют с интересующим белком. Новые неизотопные реагенты и методы продолжают делать этот метод более доступным и простым в использовании для любого исследователя.

Экспериментальная стратегия переноса биотиновой метки Sulfo-SBED и анализа методом вестерн-блоттинга.


Дальневосточный блот-анализ

Подобно тому, как анализы «pull-down» отличаются от ко-IP в обнаружении белок-белковых взаимодействий с использованием меченых белков вместо антител, так и анализ дальнего вестерн-блоттинга отличается от анализа вестерн-блоттингом , поскольку выявляются белок-белковые взаимодействия путем инкубации белков, подвергнутых электрофорезу, с очищенным, меченым белком-приманкой вместо антитела, специфичного к целевому белку, соответственно.Термин «далеко» был принят, чтобы подчеркнуть это различие.

Схема дальнего вестерн-блоттинга для анализа белок-белковых взаимодействий. В этом примере меченый белок-приманка используется для зондирования переносящей мембраны или геля на предмет белка жертвы. После связывания антитело, конъюгированное с ферментом (пероксидаза хрена; HRP), которое нацелено на бирку-приманку, используется для обозначения взаимодействия, которое затем обнаруживается ферментативной хемилюминесценцией. Этот общий подход может быть скорректирован с помощью немаркированного белка приманки, который обнаруживается антителами, биотинилированного белка приманки, который обнаруживается конъюгированным с ферментом стрептавидина, или меченного радиоактивным изотопом белка приманки, который обнаруживается при воздействии на пленку.


  1. Golemis E (2002) Взаимодействие белков и белков: руководство по молекулярному клонированию. Колд-Спринг-Харбор (Нью-Йорк): Лабораторный пресс Колд-Спринг-Харбор. p ix, 682.
  2. Phizicky EM, Fields S (1995) Белковые взаимодействия: методы обнаружения и анализа. Microbiol Rev 59: 94–123.
.

Смотрите также

 
 
© 2020 Спортивный клуб "Канку". Все права защищены.